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  • Mag-Beads 96 Well Plasmid DNA Mini-Preps Kit

    磁珠法高通量质粒小量提取试剂盒

    ¥698.00 ¥968.00

    CW3083S

    96 preps
    4800 preps(50ⅹ96 preps)

    - + [ 现货 ]

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    • 产品介绍
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    • FAQs

    本试剂盒包含独特的缓冲液体系与纯化磁珠,在核酸自动提取仪的配合下,可实现高通量快速纯化 1~5 mL 菌液的质粒DNA。制备的质粒样品适用于一代测序、载体构建、PCR 和 qPCR 等下游应用。

    保存条件 运输条件
    RT(15-30℃) 常温
    Q1:是否需要额外购买仪器?
    A1:

    是的,需配备全自动核酸提取仪、振荡混匀仪、离心机等设备。若采用负压抽滤方式,还需真空泵和抽滤装置。

    Q2:使用前发现深孔板中出现磁珠结块是否需要担心?
    A2:

    无需担心。运输过程中磁珠沉淀属正常现象,不影响产品性能。建议使用前颠倒数次使磁珠重悬。

    Q3:提取的DNA有基因组污染?
    A3:

    振荡过于剧烈,导致基因组DNA断裂。

    Q4:提取的质粒能否直接用于转化?
    A4:

    可以,该试剂盒提取的质粒纯度满足转化、酶切、PCR等需求。

    Q5:CW3083S里面的 RNase A 和 Buffer P 1 混合后,说明书建议 2-8℃存放,放到室温2天还可以用吗?
    A5:

    可以。最好按照标准存放。

    Q6: 产物有RNA残留的原因及解决办法?
    A6:

    (1)储存温度不当或超出有效期:已加入RNase A的Buffer P1长时间室温放置可能会出现酶活下降,使用后应及时放回2 ~ 8℃。

    2)菌液体积过高:由于菌体数量过多,导致Buffer P1RNase A不足以消化菌体中的RNA,建议减少菌液体积进行实验。

    Q7:能否使用Mag-Beads 96 Well Plasmid DNA Mini-Preps Kit (CW3083S) 提取的DNA进行转染实验?
    A7:

    本试剂盒未包含去内毒素步骤,提取产物可能影响转染效率。如需进行细胞转染实验,建议选用专门去内毒素的EndoFree Plasmid Mini KitCW2106S)进行DNA提取。

    Q8:CW3083S可以用来提取酵母质粒吗(将质粒转化到酵母感受态)?
    A8:

    不可以,因为酵母是真菌,细胞壁比大肠杆菌(细菌)的更厚,因此使用CW3083S更难裂解,建议使用Yeast Plasmid Mini KitCW0509S )提取。

    Q9:使用Mag-Beads 96 Well Plasmid DNA Mini-Preps Kit 时,为什么在琼脂糖凝胶上观察到质粒条带上方有拖尾现象?
    A9:

    在质粒条带上方出现的拖尾现象可能表明质粒提取物中存在基因组DNA污染。虽然这种情况并不常见,但基因组DNA可能在裂解过程中被剪切并与质粒共同纯化。加入Buffer P2后剧烈摇晃或涡旋可能会产生断裂的基因组DNA,应避免这种情况。如果裂解液非常粘稠且混合不均匀,建议减少小提实验使用的细胞起始量。

    Q10:使用Mag-Beads 96 Well Plasmid DNA Mini-Preps Kit进行质粒提取后,哪些因素会影响提取产物的A260/280比值?
    A10:

    A260/280比值通过比较核酸最大吸收峰260nm与蛋白质最大吸收峰280nm的吸光度值,可评估所洗脱DNA的相对纯度。若中和反应不充分或洗涤步骤不完全,可能导致过量蛋白质残留在基质中并与DNA共同洗脱。

    Q11:使用Mag-Beads 96 Well Plasmid DNA Mini-Preps Kit进行质粒提取后,哪些因素会影响提取产物的A260/230比值?
    A11:

    培养基成分和某些细胞成分会降低A260/A230比值。按照实验方案操作可确保去除这些污染物。此外,某些颗粒物可能与DNA一起洗脱,从而影响该比值。若出现这种情况,可在分光光度计(如Nanodrop®)检测前对洗脱的DNA进行额外15秒离心以沉淀颗粒物。

    Q12:菌液体积是否有限制?
    A12:

    推荐每孔750~1500 μL菌液。若菌液浓度低,可离心后合并菌体,但需确保最终体积不超过深孔板容量。

    Q13:裂解后溶液未变紫色/黄色怎么办?
    A13:

    未变紫色:裂解不充分,检查Buffer P2是否失效或菌量过多;未变黄色:中和不完全,增加Buffer P3用量或混匀时间。

    Q14:质粒得率低可能的原因?
    A14:

    (1)菌体量不足或培养时间过短;

    (2)质粒拷贝数低(如pBR322衍生载体);

    3)裂解或中和不充分。

    Q15:能否手动操作代替自动化提取?
    A15:

    可以,但需自行转移裂解液至样本板,且效率较低。

    Q16:CWRed/CWRed-L是否必须使用?
    A16:

    非必需,但建议添加颜色指示剂(CWRed/CWRed-L)以监控实验进程:

    (1) 添加指示剂的P1溶液呈红色;

    (2) 加入P2后溶液变为均一紫色,表明细胞充分裂解;

    3 加入P3后溶液转为均一黄色,表明中和反应完成。

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