
Magbead Soil And Stool DNA Kit
磁珠法土壤与粪便DNA提取试剂盒
¥798.00
CW2556M
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该试剂盒提供了一种简单、快速、高效的提取DNA方法,适用于土壤和粪便样本,采用独特的去抑制剂方法,有效的去除常见抑制物,同时配备的研磨珠可高效裂解样本,充分的对核酸进行释放。在高盐存在时,DNA结合于硅基包被的Magbeads表面。漂洗后,高纯度的DNA被洗脱于Buffer EBL或去离子水中。纯化得到的DNA纯度好,完整度高,可用于二代测序(16S、ITS、全基因组)、定量PCR、芯片检测等下游实验。
该试剂盒可与32通道核酸提取仪和96通道核酸提取仪进行搭配使用,简单、快速地进行高通量提取,大大提高了实验者的工作效率、降低了实验中的人为误差。
▪ 得率高:具有良好的核酸回收效率,更好的应用于下游检测应用。
▪ 纯度好:提取的核酸抑制物少,极大的提高下游检测的成功率。
▪ 自动化:可配套全自动核酸提取仪,进行高通量大样本的提取。
1. 良好的提取得率
【实验一】使用磁珠法土壤与粪便DNA提取试剂盒提取来自6个志愿者粪便(200mg)与6份土壤(200mg)的核酸,并通过NanoDrop One微量分光光度计测量并计算核酸产量。结果如图:
图1:粪便和土壤的核酸提取产量
实验结果表明:w66国际·利来提取试剂盒拥有良好的提取得率。
2. 优越的纯度与完整度
【实验二】使用磁珠法土壤与粪便DNA提取试剂盒提取来自6个志愿者粪便的核酸,通过NanoDrop One微量分光光度计测量及1%琼脂糖凝胶电泳测量DNA的纯度与完整度,结果如图:图中显示了A260/280值与A260/230值
图2:粪便核酸纯度和琼脂糖凝胶电泳图
实验结果表明:w66国际·利来提取试剂盒拥有卓越的提取纯度与完整度。
3. 独特的去抑制物能力
【实验三】使用w66国际·利来与A公司试剂盒提取粪便基因组后使用荧光定量仪对提取的粪便核酸进行扩增。结果如图:
图3:粪便核酸扩增图
实验结果表明:w66国际·利来磁珠法土壤与粪便DNA提取试剂盒因为其独特的去抑制剂成分能够去除影响qPCR的抑制物,能够更好的扩增细菌通用基因。
4. 良好的提取丰度
【实验四】将w66国际·利来磁珠法土壤与粪便DNA提取试剂盒提取的粪便核酸(图中左边3个样本)与B公司提取的粪便核酸(图中右边3个样本)提取的粪便核酸进行测序,并按照界(Kingdom)、门(Phylum)、纲(Class)、目(Order)、科(Family)、属(Genus)进行分析。
图4:粪便核酸微生物物种丰富度和相对丰度图
实验结果表明:与A公司相比,w66国际·利来磁珠法土壤与粪便DNA提取试剂盒提取的细菌核酸丰富度更高。


保存条件 | 运输条件 |
---|---|
Buffer RIL 2-8℃,others RT (15-30℃) | 常温 |

适用于土壤和粪便样本,也支持经非裂解型粪便保存液(如CWY041S/M)保存的样本。
使用前需涡旋振荡至少20秒,确保磁珠完全混匀。严禁离心或冷冻,否则可能对磁珠导致不可逆损伤。
支持。该试剂盒可配套w66国际·利来品牌的32通道(CWE2100/CWE3200)或96通道(CWE9600/CWE960)的全自动核酸提取仪使用,实现高通量、自动化的DNA提取流程。
可使用涡旋振荡仪、TissueLyser II、PowerLyzer 24、FastPrep-24等设备。
DNA产量低通常由以下原因导致,请根据实际情况优化操作:
Buffer QSL出现沉淀。解决办法:用前请先检查Buffer QSL是否出现沉淀,如有沉淀,可加热溶解。
缓冲液蒸发。解决办法:确保缓冲液密封保存,避免蒸发。
漂洗缓冲液未加入无水乙醇。解决办法:Buffer GW1和Buffer GW2使用前应分别加入104 mL和116 mL无水乙醇。
洗涤过程中DNA损失。解决办法:在磁力架上吸弃液体时,枪头不要接触附着在管壁上的磁珠团。确保步骤5的晾干时间(5-10分钟),直到磁珠表面变成哑光且无干裂再进行洗脱。
Magbeads SN混匀不充分。解决办法: Magbeads SN使用前需充分涡旋混匀至少20秒,每处理6-10个样本后需补充涡旋10秒以维持溶液稳定性。
DNA在下游应用中表现不佳通常由以下原因导致:
1. 洗脱液中DNA含量极低。解决办法:请参考前文A5部分的解决方案。
2. 洗脱液中存在磁珠残留。解决办法:微量磁珠残留通常不影响实验结果。如需进一步去除,可将含有洗脱液的离心管置于磁力架上吸附后,小心转移上清至新管。
3. 存在盐离子残留。解决办法:严格按操作顺序使用漂洗缓冲液,特别注意的是漂洗完成后将离心管开盖室温静置5-10分钟,确保乙醇完全挥发。
4. DNA用量过多影响下游实验。解决办法:过量DNA可能抑制酶反应,建议使用分光光度计在260nm处测定DNA浓度,精确控制使用量。
DNA纯度偏低(A260/A280比值较低)的常见原因及解决方案:
1. 乙醇残留导致比值偏低。解决办法:洗脱前确保乙醇完全挥发。
2. 蛋白质残留。解决办法:确保Buffer GW1和Buffer GW2使用前应分别加入104 mL和116 mL无水乙醇。
3. 未校正背景值造成偏差。解决办法:必须测定320 nm吸光度,并从260 nm和280 nm读数中扣除该背景值。
4. 水洗脱导致pH不稳定。解决办法:避免使用纯水洗脱,建议采用Buffer 维持稳定pH值。
实验操作上需特别注意磁珠使用前应充分涡旋混匀,严格按照说明书要求放置96孔板,完整执行所有洗涤步骤。