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    核酸提取或纯化试剂

    ¥798.00

    CWY005S

    瓶装I型:100次/盒

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    • 产品介绍
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    • 产品说明书
    • FAQs
    该试剂盒适用于从新鲜或冷冻的抗凝全血、唾液、细胞等样本中提取基因组DNA。该试剂盒既可进行手工操作,也可配合自动化仪器,高通量提取全血DNA。
    保存条件 运输条件
    4-30℃ 常温
    Q1:该试剂盒适用于哪些样本类型?
    A1:

    适用于新鲜血液、抗凝全血、唾液和细胞。

    Q2:使用瓶装型产品提取的DNA产量低的解决办法?
    A2:

    DNA产量低通常由以下原因导致,请根据实际情况优化操作:

    1. 裂解缓冲液出现沉淀。解决办法:用前请先检查裂解缓冲液是否出现沉淀,如有沉淀,可在56℃水浴几分钟重新溶解。

    2. 缓冲液蒸发。解决办法:确保缓冲液密封保存,避免蒸发。

    3. 漂洗过程中出现DNA损失。解决办法:漂洗缓冲液1和漂洗缓冲液2使用前应按试剂瓶标签加入无水乙醇。

    4. 磁珠悬浮液及异丙醇-磁珠混合物混匀不充分。解决办法:(1) 磁珠悬浮液使用前需充分涡旋混匀至少20秒;(2)异丙醇-磁珠混合液配制后必须再次涡旋振荡20秒以确保溶液均一;(3)每处理6-10个样本后需补充涡旋10秒以维持溶液稳定性。

    5. 样本裂解不完全。解决办法:加入裂解缓冲液后涡旋5秒,56℃水浴15分钟(期间涡旋2次),使其充分混匀。

    6. 冷冻抗凝血液样本解冻后混合不当。解决办法:冷冻抗凝血液需提前在室温下放置,融化混匀。

    7. 起始物料的储存不当。解决办法:使用新鲜或妥善保存的样本(避免反复冻融)。

    8. 样本投入量多。解决办法:血液体积大于或小于200 μL,蛋白酶K、裂解缓冲液和异丙醇与磁珠混合物的用量需按比例调整。

    Q3:使用瓶装型产品纯化的DNA在下游应用中表现不佳该如何解决?
    A3:

    DNA在下游应用中表现不佳通常由以下原因导致:

    1. 洗脱液中DNA含量极低。解决办法:请参考前文A2部分的解决方案。

    2. 洗脱液中存在磁珠残留。解决办法:微量磁珠残留通常不影响实验结果。如需进一步去除,可将含有洗脱液的离心管置于磁力架上吸附后,小心转移上清至新管。

    3. 存在盐离子残留。解决办法:严格按说明书操作顺序加入漂洗缓冲液。 

    4. DNA用量过多影响下游实验。解决办法:过量DNA可能抑制酶反应,建议使用分光光度计在260 nm处测定DNA浓度,精确控制使用量

    Q4:使用瓶装型产品纯化的DNA的A260/A280比值较低该如何解决?
    A4:

    DNA纯度偏低(A260/A280比值较低)的常见原因及解决方案:

    1. 乙醇残留导致比值偏低。解决办法:洗脱前确保乙醇完全挥发。 

    2. 蛋白质残留。解决办法:确保漂洗缓冲液1和漂洗缓冲液2使用前应按试剂瓶标签加入无水乙醇。

    3. 盐离子残留影响测量。解决办法:确保结合和漂洗缓冲液洗涤后完全清除上清,必要时用细枪头吸尽残留液体。

    4. 未校正背景值造成偏差。解决办法:必须测定320 nm吸光度,并从260 nm和280 nm读数中扣除该背景值。

    5. 水洗脱导致pH不稳定。解决办法:避免使用纯水洗脱,建议采用洗脱缓冲液维持稳定pH值。

    Q5:磁珠悬浮液使用应注意什么?
    A5:

    磁珠悬浮液严禁冰冻或离心,否则可能造成不可逆的损伤,使用前需充分振荡混匀以确保均匀性。

    Q6:能否用水洗脱DNA?
    A6:

    若下游实验对pH值或EDTA敏感,可采用灭菌水作为洗脱液。使用前需调节水的pH值至7.0-8.5(可用NaOH调节),pH值低于7.0会显著降低洗脱效率。如需长期保存洗脱产物,推荐使用洗脱缓冲液洗脱,并于-20℃保存。

    Q7:CWY129S与CWY005S有什么区别?
    A7:

    CWY005SDNA提取得率较高,但纯度可能稍逊于CWY129S

    Q8:预装型产品能否手动操作代替自动化提取?
    A8:

    预装型产品专为自动化流程设计,手动操作可行但需注意:

    1. 需自行转移试剂,操作繁琐且耗时;

    2. 得率和纯度可能略低于自动化提取。

    Q9:使用预装型产品提取的DNA产量低的原因及解决办法?
    A9:

    原因:样本质量不佳;磁珠吸附或洗涤步骤不彻底。解决方法:对于样本处理,新鲜样本应尽快处理或-70℃冻存,避免反复冻融;实验操作上需特别注意异丙醇和磁珠的规范处理,包括移液枪吹吸混匀、充分涡旋振荡20秒使其均匀混合,严格按照说明书要求放置96孔板,完整执行所有洗涤步骤,特别要注意在仪器运行23分钟暂停时及时加入异丙醇-磁珠混合液并确保异丙醇-磁珠混物充分混匀。

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