
核酸提取试剂
¥298.00
CWY004M
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本试剂盒适用于多种样本类型(如新鲜/冷冻动物组织、细胞、血液与细菌等)的DNA提取。其优化的缓冲体系可高效特异地将DNA结合至硅基质吸附柱,经两步洗涤有效去除PCR及酶促反应抑制剂,最终通过低盐缓冲液或水洗脱获得高质量DNA产物。所得DNA纯度高,可直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文库构建、Southern blot、分子标记等下游实验。

保存条件 | 运输条件 |
---|---|
0-35℃ | 常温 |

(1)裂解不完全:适当延长步骤裂解时间,在裂解期间增加颠倒混匀次数;
(2)样品量太多:调整样品投入量,并按照比例加入裂解缓冲液和蛋白酶K。
如果下游实验对RNA污染比较敏感,可以在加入蛋白酶K 前加入4 μL DNase-Free的RNase A(100 mg/mL)。
不可以。
若下游实验对pH值或EDTA敏感,可采用灭菌水作为洗脱液。使用前需调节水的pH值至7.0-8.5(可用NaOH调节),pH值低于7.0会显著降低洗脱效率。如需长期保存洗脱产物,推荐使用洗脱缓冲液,并于-20℃保存。
20 mM Tris,pH8.0;2 mM Na2-EDTA ;1.2% Triton X-100;终浓度为20 mg/mL的溶菌酶。
(1) 应尽可能选择新鲜的样本;
(2) 样本起始投入量不要超过所用方法的起始量标准;
(3) 样品保存时要尽可能的避免反复冻融;
(4) 样本应进行充分裂解:组织样本应充分研磨或匀浆处理;延长56℃孵育时间(特别是难裂解样本如鼠尾可过夜消化);必要时可额外添加20μL蛋白酶K;如果提取次生代谢产物大量积累或细胞壁厚的细菌培养物的基因组,建议在对数生长期早期收集样品。
(5)漂洗缓冲液1和漂洗缓冲液2中无水乙醇添加量不准确或漏加,应按照试剂瓶标签正确添加无水乙醇;
(6)洗脱不充分: DNA 产物洗脱的时候,预热洗脱液并滴加在膜中央位置,尽可能的覆盖整个吸附膜,增加洗脱体积或者二次洗脱也可增加产量。
1. A260/A280比值低(<1.7)。原因:蛋白或乙醇残留导致污染。解决方法:
1) 确保裂解充分:使用前请检查裂解缓冲液1和裂解缓冲液2是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将裂解缓冲液于56℃水浴孵育重新溶解。
2) 去除乙醇残留:吸附柱空离2分钟后将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
2. A260/A280比值高(>2.0)。原因:RNA残留或核酸降解。
解决方法:
1) 可在加入蛋白酶K 之前加入4 μL RNase A(100 mg/mL)溶液,震荡15秒,室温放置5 分钟。RNase A本试剂盒并未提供,如需要可单独向本公司订购,货号:CW0601S。
2) 避免降解:使用新鲜样本,避免样本反复冻融。
3) 优化洗脱:若采用灭菌水作为洗脱液。使用前需调节水的pH值至7.0-8.5(可用NaOH调节)。